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大发快三PF用带目标基因的质粒(pEGFP-N1)转染He
发布时间:2020-02-11 09:10

  PF用带目标基因的质粒(pEGFP-N1)转染HepG2细胞,用G418筛选稳定表达株10天,GFP表达减弱减少。

  PF用带目标基因的质粒(pEGFP-N1)转染HepG2细胞,用G418筛选稳定表达株10天,GFP表达减弱减少。

  目的基因和GFP构成融合蛋白,转染后24小时,空载表达GFP70%,大发快三。但目的基因表达GFP很弱很少,经筛选后,连空载都表达减弱减少,不知道是何原因?...

  目的基因和GFP构成融合蛋白,转染后24小时,空载表达GFP70%,但目的基因表达GFP很弱很少,大发快三经筛选后,连空载都表达减弱减少,不知道是何原因?

  只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释。所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象。只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定

  G418浓度是经过梯度筛选的有效作用浓度,不会浓度偏高,而且细胞数量不少,只是转进去发光的细胞甚少